As infecções por Pseudomonas aeruginosa representam importante ameaça à saúde pública devido à sua elevada capacidade de desenvolver resistência antimicrobiana (RAM). Nesse contexto, a tecnologia CRISPR-Cas surge como alternativa promissora no combate a esse patógeno, inativando genes de resistência e potencializando a eficácia dos tratamentos. Desta forma, esta revisão objetivou avaliar a eficácia da tecnologia CRISPR-Cas como ferramenta biotecnológica no combate à RAM em P. aeruginosa. Trata-se de uma revisão sistemática, seguindo o modelo PRISMA, com o auxílio do software Mendeley. Utilizou-se os descritores consultados no DeCS/MeSH: “CRISPR-Cas” e “Pseudomonas aeruginosa” combinados por meio do operador booleano “AND”. Foram selecionados 11 estudos originais, publicados nos últimos 5 anos, disponíveis na íntegra, redigidos em inglês ou português, conduzidos em modelos in vitro e in vivo. Foram excluídos trabalhos de revisão, publicações duplicadas, textos restritos e temas não associados. Os estudos indicam que a tecnologia de CRISPR-Cas pode ser aplicada para identificação de genes associados à sobrevivência e virulência de P. aeruginosa, para a inibição de genes reguladores da resistência e modificação genética de bacteriófagos. Conclui-se que essa tecnologia apresenta grande potencial no enfrentamento da RAM em P. aeruginosa, possibilitando a identificação rápida e precisa de determinantes genéticos associados à resistência.