Anadenanthera colubrina Vell. Brenan (Fabaceae), conhecida por angico, é uma espécie nativa do Brasil, amplamente utilizado na medicina popular. Objetivou-se avaliar o perfil químico do extrato hidroetanólico das cascas do caule de A. colubrina (Ac-HE), bem como avaliar as atividades antioxidante, antimicrobiana e a citotóxica. O espectro do FTIR-ATR indicou grupos funcionais compatíveis com compostos fenólicos como taninos e flavonoides. A presença de compostos fenólicos e flavonoides foram confirmadas com 337,9 ± 3,7 ?g EAG/g e 310,4 ± 2,1 ?g EQ/g, respectivamente. O Ac-HE teve expressiva atividade antioxidante, CI50 = 0,114 ± 0,009 ?g/mL para o teste do DPPH e CI50 = 0,411 ± 0,248 ?g/mL para o teste do ABTS e demonstrou propriedades antibacterianas frente a cepa de S. aureus (ATCC 29213), com CIM de 1 mg/mL e CBM de 2 mg/mL. Por fim, o Ac-HE não interferiu na viabilidade celular de fibroblastos (L929). Em conclusão, esse estudo ressalta a importância de explorar as propriedades bioativas de A. colubrina em futuras pesquisas para desenvolvimento farmacêutico, valorizando seu potencial etnomedicinal.