As Infecções Relacionadas a Saúde Pública (IRAS) são um problema mundial, com cerca de 1,4 milhões de pessoas são infectadas a cada hora. Entre os patógenos envolvidos está a E. coli, um bacilo gram-negativo pertencente a microbiota intestinal da maioria dos organismos de sangue quente, que possui elementos genéticos moveis que podem transformá-la em patogênica e resistente a antimicrobianos para muitas espécies de animais e para humanos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar e caracterizar 44 isolados multirresistentes de E. coli originários do HU-UNIVASF quanto a seu perfil de resistência a antibióticos (bomba de efluxo e formação de biofilme) e índice de resistência múltipla aos antimicrobianos (IRMA). A resistência aos antibióticos foi determinada através da técnica de disco aproximação e caracterização da resistência com o auxílio do sistema automatizado BD Phoenix™ 100. A produção de biofilme em ágar vermelho congo. A determinação dos mecanismos de resistência aos antimicrobianos (Bomba de efluxo) foi feita através da cultura em meio contendo EtBr (Brometo de etídio) e a produção de ?-lactamases foi determinada através da análise da interseção dos alos e formação de “zona fantasma’. Os isolados apresentaram alto índice de resistência a antimicrobianos das classes das penicilinas (ampicilina= 86,4%); quinolonas (ciprofloxacino= 49%); cefalosporinas (cefepima 47,7%); Sulfonamidas (Trimetropim+ Sulfametroxazol- 47,7%) e Fluroquinolonas de 3ª geração (Levofloxacina- 34,1% e Ofloxacina 42%) e baixo índice de resistência aos da classe dos nitrofuranos (nitrofurantoina= 95%). Quanto ao perfil de resistência a antibióticos, 86% (38/44) foram positivos para a presença de bombas de efluxo e 46% (20/44) para formação de biofilme. IRMA & #62; 0,2 foi observado em 66% (29/44) dos isolados, sendo 46% (20/44) resistentes a 2~6 antibióticos; 18% (8/44) a 7~9 antibióticos e 25% (11/44) a 10~14 antibióticos. Além destes 7% (3/44) foram resistentes a nenhum dos antibióticos e 4% (2/44) a apenas um antibiótico. Conclui-se que isolados de E. coli são multirresistentes a antimicrobianos das classes das penicilinas, quinolonas, cefalosporinas, sulfonamidas e fluroquinolonas, formam biofilme e apresentam bomba de efluxo. Estes achados contribuem para escolhas mais eficientes para o tratamento de infecções resistentes ocasionadas por este patógeno.