Este estudo in vitro avaliou a influência de um enxaguante bucal à base de extrato de Cannabis Sativa L. na ultramorfologia e variação de cor do esmalte dental bovino. Trinta espécimes foram distribuídos aleatoriamente em três grupos: GC (água destilada), GCN (enxaguante de cannabis) e GCX (clorexidina 0,12%). Foram realizados ciclos de imersões 2 vezes ao dia, por 1 minuto, com intervalo 12 horas entre os ciclos, por 7 dias. As análises de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e Espectrometria de Energia Dispersiva (EDS) ocorreram após os ciclos, já a leitura de cor (L*) ocorreu antes (T0) e após o último ciclo (T1). A análise morfológica por MEV revelou que o GCN apresentou superfície mais lisa e homogênea, sem sinais de erosão. Notou-se discreto aumento dos níveis de cálcio no grupo GCN, sem diferença para o fósforo. O enxaguante de cannabis não promoveu variação significativa dos parâmetros cor, enquanto GCX mostrou redução de L, indicando escurecimento. Os resultados sugerem que o enxaguante de cannabis influenciou positivamente na ultramorfologia do esmalte, além de preservar estabilidade de cor.